较早公告: CCK-8细胞增殖及毒性检测的步骤详细说明1.向各孔中加入100μl细胞悬液。a)2.在37℃下预孵育培养板。b)3.向各孔中加入各浓度的待测溶液c)10μl。4.37℃下孵育。5.向各孔中加入10μl的CCK-8溶液d)。6.37℃下孵育1-4小时。e)7.测定450nm处的OD值。a)使用适当的培养基制备50,000-100,000个/ml的细胞悬液。b)建议使用CO2培养箱guo夜预培养。c)使用培养基或PBS来制备溶液。d)如果待测溶液有还原性,测定不含细胞,但含有CC
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钙离子荧光探针系列的使用说明以及需要注意的问题
点击次数:364 发布时间:2018-07-06

  Fluo-8 AM 钙离子荧光探针系列应用

  1、过程概述

  Fluo-8 AM 钙离子荧光探针系列用于细胞内钙离子检测时,Fluo-3 AM的常用浓度为5μM。通常用含有5μM的Fluo-3 AM的适当溶液和细胞一起在37℃孵育30-60分钟进行荧光探针装载,随后适当洗涤,洗涤后可以考虑适当再孵育20-30分钟以确保Fluo-3 AM在细胞内完全转变成Fluo-3。然后在流式细胞仪上进行检测。

  2、Fluo-8 AM 钙离子荧光探针系列使用液的配置

  100ug的Fluo-3AM,分子量是1219.9。按实际需要的摩尔浓度折算,无水DMSO溶解。一般配置成1~5mM的DMSO储存液。如出现难溶现象,可以用20%的F127的DMSO溶液助溶。

  Fluo-8 AM 钙离子荧光探针系列使用注意事项:

  1、荧光染料有淬灭问题,应尽量避光保存;

  2、实验时注意个人防护,戴手套、口罩;

  Fluo-8 AM 钙离子荧光探针系列应用举例

  2、贮存液的配制(5000μM/L)

  按照说明书,计算0.1mg 的摩尔数为0.089μM ,则需加DMSO18uL,微量加样器反复吹打混匀后分装,按说明书要求避光-20度冰冻保存。

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